当前位置: 首页 > 关于我们 > 公司新闻 > 干细胞治疗前景广阔,支原体防控刻不容缓
18

干细胞治疗前景广阔,支原体防控刻不容缓


先达基因 / 2019-11-07

干细胞(Stem Cell)是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下可以分化成多种功能细胞,具有自我更新、多向分化潜能、低免疫原性和良好的组织相溶性等特点。一般来讲,干细胞治疗是通过干细胞移植来替代、修复患者损失的细胞,恢复细胞组织功能,从而治疗多种类型的疾病,主要的治疗方法分为干细胞移植、干细胞再生技术、自体干细胞免疫疗法等。干细胞在临床中得以应用主要是由于干细胞具有归巢能力、增殖分化能力和分泌生长因子等能力。

   近两年,干细胞治疗可谓占尽风头。近日,北京大学-清华大学生命科学联合中心的有关团队发表了题为《利用CRISPR基因编辑的成体造血干细胞在患有艾滋病合并急性淋巴细胞白血病患者中的长期重建》的研究论文。研究结果显示,基因编辑后的造血干细胞移植治疗使患者的急性淋巴白血病和艾滋病得到完全缓解。

2018829日,空军军医大学(第四军医大学)的研究人员在人体临床试验中证实,利用来自乳牙的干细胞可再生牙髓组织。

今年912日据法国《巴黎人报》报道,七届F1冠军、德国车王舒马赫在巴黎接受干细胞治疗后已神志清醒。一位在医院工作的护士透露:他是我的病人,我可以向你保证,他目前是清醒的。2013年遭遇滑雪事故后,舒马赫已经卧床治疗了近6年,今年19日他在病床上度过了自己50岁的生日。舒马赫醒了!据医生介绍,目前已恢复意识。昏迷的人得以苏醒、瘫痪的人得以重新站起来,背后是以干细胞为核心的再生医学的功劳。

最近干细胞治疗创造出越来越多的医学奇迹,为一些疑难杂症的治疗带来了希望。干细胞治疗主要是把健康的干细胞移植到患者体内,以达到修复或替换受损细胞或组织,从而达到治愈的目的。干细胞治疗的疾病很多,而且年龄越小,改善得越明显。目前,越来越多的研究人员投入到干细胞治疗的研究当中,研究涉及的疾病基本涵盖了多种的医学难题。目前,干细胞治疗能够进行治疗的神经系统疾病有脑瘫、脊髓损伤、运动神经元病、帕金森病、阿尔兹海默症、脑出血 、脑梗塞后遗症、脑外伤后遗症等;免疫系统疾病有糖尿病、皮肌炎、肌无力、血管病变、硬化病、白血病等;其他类型疾病有如肝病、肝硬化、急性肾炎、股骨头坏死、牙髓坏死等。细胞治疗能够应用的细胞类型主要有:胚胎干细胞、骨髓间充质干细胞、脐带血间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、牙髓干细胞等等。

随着干细胞相关研究的快速发展,干细胞治疗应用已成为举足轻重的新型医疗产业,在人类疾病治疗中呈现良好的应用价值。为了适应临床需求,干细胞作为一种新型的生物制剂相继被开发。干细胞虽然已经被广泛应用于科研实验以及各种疾病的临床试验中,但是国内外对于干细胞的质量检测标准缺乏公认的标准。在国际上,多个国家也颁发了对于细胞质量检测相关法规或技术规范,其中美国和欧洲一直作为相关行业的引领者,出台了一系列干细胞制剂制备和应用相对健全的指导或规范,如美国FDA颁布了用于全面管理HCT/P (Human Cell and Tissue based Products)生产过程的指导规范,cGTP(current Good Tissue Products)、《人体细胞治疗及基因治疗条件》、《人类体细胞质量和基因治疗指南》、国际干细胞治疗学会发布的《多潜能间充质干细胞最低标准》等等。我国在细胞应用如细胞储存、基础研究过程中细胞质量控制和检验标准缺失,因干细胞组织来源多样性、研究背景复杂,导致细胞在采集、分离、扩增、冻存等体外操作过程中细胞的纯度、稳定性与有效性难以很好的控制。目前国家也提出了关于成体细胞制剂用于临床研究的质量控制原则和标准要求,如国家卫生计生委、国家食品药品监督管理总局在 2015 年联合颁布的《干细胞临床研究管理办法(试行)》等相关行业指南,据此关于干细胞质量控制的三大政策《干细胞临床试验研究管理办法》、干细胞临床试验研究基地管理办法》和《干细胞制剂质量控制和临床前研究指导原则》逐步实施。

目前国内外关于干细胞制备培养的研究比较多,但是尚未建立统一的适应于不同来源干细胞制备、过程鉴定检测的技术规范与标准。世界各国陆续出台的各类规范和指南,大部分尚为框架性或概述性的指导意见;同时国内各类干细胞公司对于细胞培养过程和终细胞产品质量控制也未能形成行业内统一标准;同时细胞类产品是一种生物活性生物制品,与一般性的药品或者生物制备存在很大的差异,其从样本的采集运输到分离培养,细胞传代培养、冻存入库、复苏等一系列过程都具有高度的被污染或交叉污染的风险,从而导致最终产品的高失败率。

为保证细胞产品出库无毒、无害、安全有效,必须从细胞制备前期、培养期及临床回输前期各个环节做好严格的质量监控。因此实验室要做到针对细胞培养的每批耗材试剂进行定期抽检,确保每批耗材试剂做到无菌,无热源,无外源支原体污染。其中最臭名昭著的要数支原体污染,支原体在环境中无处不在,调查发现其污染细胞的平均比例为30-60%,有些国家甚至高达80-90%,污染之后干细胞是可以生长,也观察不出什么异样,但是如果将污染了支原体的干细胞输给患者,干细胞在体内的分化能力大大减小,不仅起不到治疗作用,还有可能导致患者支原体感染加重病情。

1支原体检测方法比较

支原体检测方法有很多种,对这些方法和试剂盒进行比较,由表1可以看到,培养法和DNA荧光染色法工作量都较大,对于急需进行干细胞治疗的病人不适合用这两种方法对干细胞制剂进行支原体检测。RT-PCR具有高灵敏度,最低可检测到每毫升1000 拷贝的支原体,但是由于检测所用试剂费用较高,而且需要配套荧光定量PCR仪,价格非常昂贵,难以推广。LAMP法灵敏度高,但是假阳性高,很容易将没有支原体污染的干细胞检测为阳性,从而耽误治疗。ATP酶法灵敏度较低,假阴性高,容易漏检导致将支原体污染的干细胞输给病人,而且价格昂贵。与上述检测方法比较,SM@RT是最为理想的支原体检测技术(图1SM@RT技术支原体检测方法流程示意图),最低可检测到每毫升150个拷贝的支原体,而且只需在价格低廉的恒温荧光检测仪中反应并判读结果,整个检测过程无需开盖,避免气溶胶的污染导致的假阳性,具有费用低、广谱、准确、快速等优点。SM@RT技术是由苏州先达基因公司研发一种快速检测方法,可以在恒定的低温下(25℃-42℃)对痕量的支原体种内保守性DNA片段进行特异性的扩增,扩增反应可以在20min内完成,该试剂盒检测范围涵盖130种支原体。这种快速检测方法不仅能够有效的检测出干细胞制剂中的支原体污染,而且能够大大缩短检测时间,让患者避免用到受衣原体污染的制剂并且能够尽快得到安全可靠的治疗。

1 SM@RT技术支原体检测方法流程示意图

所以,干细胞制剂及产品的制备经过规范的生产工艺和严格质检流程,以防范和避免支原体等微生物的污染,让干细胞治疗这项先进的治疗技术手段,发挥其应有的疗效。先达基因以其快速、高效、准确的支原体检测技术产品为临床干细胞治疗提供强有力的质量保障,为广大患者带来福音。