先达基因推出新一代全能核酸酶
——帮您彻底摆脱核酸污染困扰
先达基因利用公司先进的基因工程和酶工程技术平台对现有广谱性核酸内切酶进行改造和进化,开发出新一代的全能核酸内切酶,能将蛋白、细胞、组织等样品中的核酸快速彻底降解,而不会使其他组分降解,具有很高的特异性。本产品不仅可应用在科研研究中作为生物样本去除核酸干扰的首选酶制剂;还可应用于疫苗工业、蛋白和多糖类制药工业,去除宿主残留核酸,提高制品生物功效。
产品性能:
· 广谱性强,能降解 所有的DNA和RNA
· 酶活性优,降解速度快、效率高
· 兼容性强,具有很强的环境耐受性
· 具有核酸特异性,对蛋白、多糖、脂类等不产生作用
该全能核酸酶基因来源于Serratia marcescens,经基因工程改造和分子定向进化获得的新一代核酸内切酶。它能降解所有的DNA(包括单链,双链,线性和环状)和RNA而不会使蛋白降解,具有很高的特异性。(RPA,支原体检测,核酸检测)
本产品作用原理为水解核苷酸间的磷酸二酯键,将各类型核酸快速消化降解为3-5个碱基长度(杂交限度以下)的5'-单磷酸寡核苷酸。本产品在非常广泛的条件下,能保持很高的稳定性和消化活力,这使其能够与多种细胞裂解液,如RIPA,或含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容(具体条件请见下表),能有效降低蛋白样品粘度,去除蛋白样品中的核酸污染,且没有蛋白酶残留。除此之外,它还可以减少样品处理时间,提高蛋白产量,使离心过程中上清和沉淀分离得更彻底,便于溶液超滤,以及提高色谱纯化效率等;后续可通过色谱纯化去除该核酸酶(其pI:6.85,SDS-PAGE下表观分子量为30 KDa)。
条件参数 |
最适条件 |
可作用条件 |
Mg2+ |
1-2 mM |
1-10 mM |
pH |
8.0-9.2 |
6.0-10.0 |
Temp |
37℃ |
0-42℃ |
DTT |
0-100 mM |
>100 mM |
β-Mercaptoethanol |
0-100 mM |
>100 mM |
Monovalent cation(Na+,K+) |
0-20 mM |
0-150 mM |
PO43- |
0-10 mM |
0-100 mM |
新一代全能核酸酶作用条件
注:
1)本产品还可耐受6 M Urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF,0.4% Sodium deoxycholate。
2)最适条件为全能核酸酶释放≥90%活力的条件,可作用条件为全能核酸酶释放≥15%活力的条件。
3)全能核酸酶活力定义为在37℃,pH 8.0反应条件,2.625 mL反应体系中,在30 min内使△A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
应用领域:
1)重组蛋白纯化或组织细胞样品蛋白提取时,全能核酸酶可以去除核酸污染,有效降低样品粘度,便于下游操作。
2)在细胞或细菌裂解液中加入全能核酸酶,可去除粗提物中的核酸,降低溶液粘度,从而增加蛋白产量。
3)减少存放的外周血单细胞(PBMC)的结块现象。
4)有效去除带负电荷的核酸对双向SDS-PAGE蛋白样品的影响,改善蛋白质的分离效果,增强二维电泳分辨率。
5)去除疫苗(蛋白质类)和病毒样品制备中的DNA污染。
保存条件:
-20℃可保存2年。
使用注意事项:
当样品为含有大量蛋白、细胞壁和其他盐分的粗制品时,对该酶活性有部分抑制作用,使用时需增加酶的用量。
(具体产品说明请参见说明书)
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文献引用
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