Endonuclease IV使用说明书

（产品货号：EM119）

描述：核酸内切酶IV来源于E.coli，是一种32 kDa的金属蛋白，参与DNA损伤修复。该酶是一个脱嘌呤/脱嘧啶（AP）核酸内切酶，识别AP位点，并切割AP位点5´端的第一个磷酸二酯键，产生3´羟基和5´脱氧核糖磷酸末端。此外该酶也具有3´二酯酶活性，可以从DNA的3´末端释放磷酸甘油醛、完整的脱氧核糖5´-磷酸和磷酸。

产品组分与规格

货号	组 分	5,000 U
EM119	Endonuclease IV（100 U/μL）	50 μL
	10× Endonuclease IV Buffer	1 mL×5

储存液及反应液

储存液：10 mM Tris-HCl，250 mM NaCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，200 μg/mL BSA，50% Glycerol，0.15% Triton X-100，pH 7.4 @ 25℃。

反应液（10× Endonuclease IV Buffer）：500 mM Tris-HCl，1 M NaCl，100 mM MgCl2，10 mM DTT， pH 7.9 @ 25°C。

酶活定义

一个酶活单位（U）定义为：在1×Endonuclease IV Buffer (50 mM Tris-HCl @pH 7.9，100 mM NaCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT）中，10μL反应体系内，37℃反应1h，能切割1 pmol含一个AP位点的34 mer寡核苷酸双链所需要的酶量定义为一个活性单位。

应用

• 单细胞凝胶电泳

• DNA 损伤和修复研究SNP 分析

• SNP 分析

储存

-20℃，可保存2年。

使用方法

1. 按以下组分配制反应体系：

组分	每管加样量
10× Endonuclease IV Buffer	2.5 μl
Endonuclease IV	1 μl
DNA	10 pmol
ddH2O	10-50 μl
注：组分的最适加入量根据实际优化的最佳量添加。

2. 在37℃条件下孵育1小时

详见说明书：Endonuclease IV 使用说明书