Express病毒RNA快速提取试剂盒
先达基因 / 2021-01-05
（产品货号：NR202）
试剂盒描述
本试剂盒可从组织、血液、拭子、细胞等样品中快速高效纯化出高品质病毒 RNA。该试剂盒是目前我司为实现分子诊断 POCT 化而全力开发的具有国际优势性的操作步骤少、用时短的病毒 RNA提取试剂盒（仅需要 5 分钟），试剂盒中含有独特的裂解液。应用本试剂盒提取的 RNA 可直接用于核酸扩增及检测、体外逆转录、基因克隆、文库构建、杂交等多种生物学实验及研究。
样本与产量
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样本类型 |
样本量 |
产量 |
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白细胞（抗凝全血） |
<1x107 个 |
10-20 微克 |
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植物材料 |
10 毫克 |
5-20 微克 |
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哺乳动物细胞 |
1x107 个 |
8-15 微克 |
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肌肉/脑等组织 |
10 毫克 |
3-10 微克 |
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肝脏组织 |
10 毫克 |
10-20 微克 |
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血清和病毒 |
150微升 |
0.5-5 微克 |
组分规格
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序号 |
名称 |
货号 |
规格 |
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20T |
50T |
|||
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1 |
RNA LB1 |
NR202A |
6 ml |
15 ml |
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2 |
RNA BB2 |
NR202B |
16 ml |
40 ml |
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3 |
Washing Buffer（已含乙醇） |
NR202C |
25 ml |
55 ml |
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4 |
Nuclease Free H2O |
NR202D |
4 ml |
10 ml |
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5 |
吸附柱 |
-- |
20套 |
50套 |
储存、运输条件及有效期
室温运输全部避光保存，可保存2年。（请在有效期内使用）。
注意事项
*试剂盒中的Washing Buffer中已经加乙醇，无需单独添加。
*RNA LB1和RNA BB2均具有腐蚀性，注意防护。
*病毒样品等提取时不能涡旋震荡，防止气溶胶污染。
检测步骤
1. 裂解/上柱（1.5ml EP管中处理）：
A、 液体样本：
血清、血浆、唾液、痰液、尿液、细胞培养病毒上清液等液体样本直接吸取 150 μl 到 1.5ml -2.0ml 的 EP 管中，并加入 120 μl RNA LB1，上下颠倒混合均匀约 10 秒。打开 1.5ml EP 管盖，并加入 500 μl RNA BB2 中，上下颠倒混合均匀约 10 秒。倒入吸附柱中，13000 rpm 离心 30 秒，倒掉过柱后的废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。
B、 抗凝全血：
直接吸取 150 μl 到 1.5 ml EP 管中，并加入 120 μl RNA LB1，上下颠倒混合均匀约 10 秒。打开
1.5 ml EP 管盖，并加入 500 μl RNA BB2 中，上下颠倒混合均匀约 10 秒。13000 rpm 离心 30 秒后，将上清液倒入吸附柱中，13000 rpm 离心 30 秒，倒掉过柱后的废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。
C、 固体样本：
组织、粪便等样本。取 10~100 mg 固体材料样本，加入到 300 μl RNA LB1 中（1.5ml EP 管）， 并加入几粒钢珠（一般 3~4 粒），置于组织研磨仪中，研磨 1 分钟。研磨完毕后，打开管盖，向匀浆液中加入 750 μl RNA BB2，并 13000 rpm 离心 1 分钟。打开管盖，用 1 ml 吸头吸取 750 μl 上清液到吸附柱中。13000 rpm 离心 30 秒，倒掉过柱废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。
2. 洗涤和洗脱：
上述裂解/上柱操作完毕后，向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer，13000 rpm 离心 15 秒，并倒掉过柱废液。重复此洗涤步骤一次。将吸附柱重新放回离心机，13000 rpm 空离心 1min，将残留的乙醇彻底甩干。将吸附柱芯放入到 1.5 mL Nuclease Free 收集管中，向吸附柱芯中加入 20~50 μl Nuclease Free H2O，室温放置 1 min，13000rpm 离心 1min，洗脱液即为提取的病毒 RNA，冷冻保存。
特别说明
(1) RNA LB1 和 RNA BB2 含有高盐，在样本加入到此溶液后，病毒会迅速灭活。同时此溶液对皮肤有腐蚀性，务必做好防护，如接触到皮肤，用大量清水冲洗。
(2) 样本处理过程中的吸头等材料可能含有病毒分子，实验完毕后务必妥善处理，不能随意丢弃。
