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研究 | ERA技术助力猫杯状病毒和猫疱疹病毒I型双ERA现场检测方法的建立与应用(IF:5.913)


GenDx / 2023-06-02

导读

目前,宠物猫在宠物家庭中的比例日益上升,数量已经超过了狗。猫杯状病毒(FCV)和猫疱疹病毒I型(FHV-1)是导致猫呼吸道疾病最常见的病毒病原体,并且经常发现这两种病原体同时感染。它们威胁着猫的健康。特别是多猫和小猫家庭的发病率很高。尽管已经研制出疫苗,但猫对这种病毒的免疫力似乎比预期的要低。在兽医诊所,FCV和FHV-1的主要诊断方法是试纸和聚合酶链反应(PCR)。然而,试纸的灵敏度不够,且PCR耗时长。因此,开发一种快速、同时检测FCV和FHV-1的方法对于预防和控制这两种病毒病原体具有不可缺少的作用。

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研究内容

华南农业大学动物医学院广东省宠物工程技术研究中心,华南农业大学动物医学院的Pei Zhou团队等建立了能够同时检测FCV和FHV-1的双ERA方法。针对FCV VP1基因和FHV-1 gB基因保守的片段中设计ERA探针和3对ERA引物,通过一系列PCR试验筛选ERA试验的最佳引物,最终选择FCV-F3/R2和FHV-F3/R1作为双ERA法的最佳引物对。通过对比对不同温度、探针比和引物比组合对扩增效果的影响。确定双ERA的最佳反应条件。成功建立FCV和FHV-1同时检测的双ERA方法。用于FCV和FHV-1的鉴别检测。


研究结论

本研究中建立的同时检测FCV和FHV-1双ERA方法对FCV和FHV-1两种病毒的检出限均为101拷贝/test,且无交叉反应,表明该检测方法具有良好的特异性。为了测试该方法在临床应用中的实用性,收集并测试了50只有呼吸道症状的猫的鼻咽拭子。FCV和FHV-1的阳性率分别为40%和14% 。FCV和FHV-1合并感染率为10% 。这些结果与实时荧光定量PCR的结果一致。因此,这种双ERA方法是一种新型高效的FCV和FHV-1检测临床诊断工具。


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本研究中,研究团队采用的ERA超增技术(Enzymatic Recombinase Amplification,酶促恒温扩增技术)由苏州先达基因科技有限公司开发,属于恒温核酸扩增技术,可以在恒温下进行,不需要热循环。






原文:Development and application of a dual ERA method for the detection of Feline Calicivirus and Feline Herpesvirus Type I(5.913)》

作者:Bo Chen, Haoyang Zhang, Hanhong Wang, Shoujun Li and Pei Zhou

期刊:Virology journal

DOI:10.1186/s12985-023-02020-3