研究背景

LSDV 对畜牧业造成的危害极为严重，致使牛的病死率上升，牛皮质量下滑，奶牛产奶量急剧减少，公牛出现不育状况，母牛发生流产现象，严重影响牛群的繁殖。它的传播范围广泛，传播途径多样，防控难度极大。快速且准确的检测极其重要，能够及时进行防控，减少损失。

创新检测方法的原理

三重级联信号放大的无标记荧光法检测LSDV的核心原理在于巧妙地利用了一系列生化反应和光学特性，实现了高效的信号放大和无标记检测。在信号放大方面，通过多个连续的反应步骤，将初始的微弱信号逐步放大。首先，设计了特定的核酸探针，这些探针能够与LSDV的特定基因序列高度特异性地结合。当LSDV存在时，引发一系列的级联反应，包括核酸的杂交、链置换等过程，每个反应步骤都能使信号得到增强，最终实现了显著的信号放大效果。

而无标记检测的实现则依赖于荧光物质的特性。在检测体系中，某些物质在受到特定波长的光照射激发后，能发射出比激发光波长更长的光。当LSDV与检测体系相互作用时，会改变这些物质的能量状态，从而产生可检测的荧光信号，无需额外添加标记物。这种无标记的检测方式不仅简化了操作流程，还降低了检测成本，提高了检测的准确性和可靠性。

在提高检测效率方面，ERA技术反应迅速，通常能在5-10分钟内完成检测，相比传统的检测方法大大缩短了时间。它操作简便，无需复杂的样品前处理，只需加入引物和模板就可反应，这极大地简化了检测流程，减少了人力和时间成本。

在灵敏度方面，ERA技术表现出色。例如，由特定引物对和探针构建的牛结节性皮肤病病毒荧光ERA恒温快速检测试剂盒，检测灵敏度可达1×10^-7 ng/μL，能够检测到微量的病毒核酸，有助于早期发现病毒感染。

在特异性方面，ERA技术通过精心设计的引物和探针，能够有效区分LSDV与其他相似病毒，如山羊痘病毒和绵羊痘病毒，避免误判，大大提高了检测的准确性。

此外，ERA技术还具有恒温扩增的特点，反应在37-42℃的较宽温度范围内均可进行，对操作温度要求不严格，降低了对实验环境和设备的要求。ERA技术凭借其在检测效率、灵敏度和特异性等方面的优势，为LSDV的准确、快速检测提供了有力支持；并在防控和发展中有重要积极影响，指明方向，有望保障健康和安全。最后感谢作者使用先达基因ERA技术，为相关领域的研究提供了新的思路和方法。