产品描述
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Bsu DNA Polymerase (Large Fragment)使用说明书
（产品货号：EM103）
概 述：
Bsu DNA Polymerase (Large Fragment)保留了Bacillus subtilis DNA聚合酶I的5'→3' DNA聚合酶活性，但是缺失了5'→3' 核酸外切酶结构域；该大片段自身缺乏3'→5'外切酶活性，是具有链置换活性的DNA恒温扩增聚合酶。
用 途：
主要应用于ERA，也可用于RPA和SIBA， DNA操作，RT-PCR和cDNA合成。
产品组分：
货号
组分
浓度
数量
体积
EM103
Bsu DNA Polymerase (Large Fragment)
5 U/μl
1管
100μl
10×Buffer 4.0
--
1管
1mL
MgCl2
100mM
1管
1mL
储存溶液：
储存液：10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 % Tween 20，0.1 mg/ml BSA，0.1mM EDTA，50 %甘油， pH 7.5 @ 25℃。
反应液（10×Buffer 4.0） ：100 mM Tris-HCl pH 7.9 @ 25℃，500 mM NaCl，100 mM MgCl2，10 mM DTT。
保存条件：
-20℃，可保存1年，避免反复冻融。
酶活定义：
一个酶活单位（U）定义为：在37℃条件下，30分钟内使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量定义为一个活性单位。
使用方法：
1. 按以下组分配制反应体系
组分
每管加样量/μl
Plasmid DNA
4
Bsu DNA Polymerase (Large Fragment)
1-4
10×Buffer 4.0
5
Random9 (100μM)
2
dNTP (10 mM each)
2
ddH2O
Up 50
注：Plasmid DNA单次反应总量为100 ng
2. 混匀后95℃ 5min，冰上放置5min，加入不同剂量Bsu DNA聚合酶（1-4μl），分别在25℃和37℃孵育3 h。
注：
1. 由于缺乏3'→5'外切酶活性，Bsu DNA Polymerase (Large Fragment)不能切除3'未配对的突出末端，因而不适用于生成平末端。
2. 25℃时Bsu DNA Polymerase (Large Fragment)保留50%的活性，是同温度下Klenow片段（3'→5'exo-）的两倍。
详见说明书：Bsu DNA Polymerase (Large Fragment)使用说明书
本类产品为八联管式检测试剂盒包装形式。 [检验方法] 恒温荧光法
