RT-Bst Polymerase使用说明书
（产品货号：EM111）

描述：RT-Bst Polymerase为ExBst DNA Polymerase和极耐热反转录酶（耐受65℃）的混合物，该酶适合于RNA的LAMP 反应。与常规DNA/RNA聚合酶相比，其反转录活性提高了近100倍，可以检测低灵敏度的RNA分子。该酶在以RNA为模板的LAMP实验中，作为推荐用酶，其扩增能力高于常规DNA/RNA聚合酶。除此外，该酶同样可以进行DNA模板的LAMP扩增。

产品组分与规格：

货号	组 分	浓度	1,600U	16KU
EM111	RT-Bst Polymerase	8 U/μl	1管×200μl	2管×1ml
	10×Isothermo Buffer	--	2管×1 ml	20 ml
	Mg2+	100 mM	2管×1 ml	20 ml

酶含量：

1μl的RT-Bst Polymerase 中包含8 U的ExBst DNA Polymerase和20U的极耐热反转录酶。

储存：

-20℃，可保存3年。

使用方法：

1. 按以下组分配制反应体系：

组分	每管加样量
10×Isothermo Buffer	2.5μl
Mg2+ (100 mM)	1.5 μl
dNTP (10 mM each)	3.5μl
10× Primers	2.5μl
RT-Bst Polymerase (8 U/μl)	0.25~1μl
DNA/RNA模板	10ng~1μg
ddH2O	Up to 25μl
注：Mg2+ 、引物、酶等各组分的最适加入量根据实际优化的最佳量添加。 10× Primers：16μM FIP/BIP、2μM F3/B3、4μM LoopF/B each。

2. 按以下条件在仪器上进行反应条件设置

温度	时间
65℃	30-60min

3. 热失活

温度	时间
85℃	5min

4. 使用注意事项：

4.1 建议不添加模板作为对照检测扩增的特异性。

4.2 如果需要优化，请尝试调整Mg²⁺（最终为4~10 mM）。

4.3 10×Isothermo Buffer中没有Mg²⁺，通常6-8mM Mg²⁺条件下可获得较好的LAMP结果。

4.4 有文献报道加入Tte Uvrd解旋酶可改善LAMP的效果。

详见说明书： RT-Bst DNA酶使用说明书