【适用范围】

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），是芽孢杆菌属的一种，广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。枯草芽孢杆菌对水产中的弧菌、大肠杆菌和杆状病毒等有害微生物有很强的抑制作用，有效预防水产动物肠炎，烂鳃等疾病。分泌大量几丁质酶的功能，几丁质酶可分解病原真菌的细胞壁而抑制真菌病害，分解养殖池中的有毒有害物质，净化水质；分解池中残饵、粪便、有机物等,具有很强的清理水中垃圾小颗粒的作用；也能够改善有害蓝藻泛溢造成的水质浑浊问题，水质由浑变清，具有很强的净化水质功能，具有较强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活性，促进饲料中营养素降解，使水产类动物对饲料的吸收利用更加充分；同时枯草芽孢杆菌可以减少对虾病害发生，可以大大提高对虾产量，从而提高经济效益，生物环保，刺激水产动物免疫器官的发育，增强机体免疫力；减少对虾病害发生，明显提高对虾产量，从而提高经济效益，净化水质，无污染，无残留。

本产品为枯草芽孢杆菌核酸检测试剂盒，基于先达基因科技有限公司自主开发的体温扩增荧光检测技术，可对枯草芽孢杆菌进行定性检测，通过实时扩增曲线，在短时间内判断样品中是否含枯草芽孢杆菌。

【检验原理】

等温核酸体外扩增技术有多种形式，包括链置换扩增(Strand Displacement Amplification,SDA)、转录介导扩增(Transcription-mediated Amplification，TMA)、环介导扩增(Loop-mediated Isothermal Amplification, LAMP)、滚环扩增(Rolling Circles Amplification, RCA)和依赖解旋酶扩增(Helicase-Dependent Amplification, HDA),重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)等。 实时荧光核酸恒温扩增检测技术是将新一代的核酸恒温扩增技术和实时荧光检测技术相结合的一种新型核酸检测技术。该技术具有高灵敏度、高特异性、低污染、反应稳定等优点。

本产品采用恒温扩增技术，通过苏州先达基因科技有限公司自主开发的ERA技术（Enzymatic Recombinase Amplification，酶促恒温扩增技术），根据枯草芽孢杆菌编码16S rRNA的基因序列作为靶序列，设计引物和荧光探针建立的检测枯草芽孢杆菌的核酸荧光定量扩增方法。大量扩增后的产物能够与带有荧光标记的探针相结合，从而产生特定的荧光。该荧光信号可由荧光检测仪器实时捕获，直观反映扩增循环情况。 样品中如果具有微量的枯草芽孢杆菌DNA存在时，则能够通过大量扩增后激发荧光信号，样本显示为阳性；如果样本中不含有枯草芽孢杆菌，仪器会判读为阴性。

【产品特点】

1. 反应温度更温和

核酸扩增在一个温度下进行（37℃），无需热循环。消耗能量更低，便于现场即时检验。

2. 扩增速度更快，效率更高

先达基因开发的等温扩增技术的扩增效率极高，10～15分钟即可将模板扩增10^9倍，扩增效率远高于其他核酸检测技术。

3. 检测结果更加准确和灵敏

由先达基因开发的等温扩增体系，为通过基因工程改造的混合酶制剂。相对于其它依赖于温度退火的核酸扩增技术，它充分利用生物酶促反应的高度特异性，反应抑制物更少，有效减少假阴性结果，增加了检测结果的准确性；同时结合荧光检测技术，使得检测更加灵敏。

4. 有效解决了扩增产物的污染问题

扩增产物的污染是核酸检测的控制难点。本公司产品采用实时荧光闭管检测，使污染得到有效控制，减少污染产生，从而大幅度提高检测结果的可靠性。

5. 适配先达基因开发的小型荧光检测仪器。

【适用仪器】

GS8、GT-16、ESE Tube Scanner、Genie II等恒温荧光检测仪， ABI 7500，LightCycler480，CFX 96等荧光定量PCR仪。其它常用荧光定量PCR仪均可使用。

【储存条件及有效期】

本试剂盒保存于-20℃，有效期为12个月。

本类产品为八联管式检测试剂盒包装形式。
[检验方法]	恒温荧光法