RT-Bst LAMP MasterMix (SYBR Green)使用说明书
(产品货号:EM112)
描述:
RT-Bst LAMP MasterMix (SYBR Green)该制品为单一组分的 MasterMix(2 倍浓度),包含了反 应缓冲液、SYBR Green 荧光染料、Mg2+、dNTP、ExBst 聚合酶等,使用时只需要加入引物、 模板即 可进行核酸恒温扩增。ExBst 聚合酶具有依赖于 RNA 模板的聚合酶活性(逆转录),还具有依赖于 DNA 的聚合酶活性,因此无论 DNA 或 RNA 样本均可使用该制品进行高效的恒温扩增。该制品是进行 LAMP 及 RT-LAMP 扩增反应的绝佳试剂。优化的反应体系,确保快速的完成检测试剂的反应体系建立。 SYBR Green 系列产品为恒温荧光扩增的专用试剂,可配套荧光定量 PCR 仪,或恒温荧光检测仪使 用。SYBR Green 的激发波长为 480nm,检测波长为 520nm。除此外,该制品还可以用于其它恒温扩增 实验,包括 CPA、SMAP 等。
产品组分与规格:
货号
EM112 名称 2xRT-Bst LAMP MasterMix (SYBR Green)
规格 1ml
使用实例(以 LAMP 恒温荧光扩增为例)
1. 配置反应体系
2x RT-Bst LAMP MasterMix (SYBR Green)
10 μl 10xLAMP Primer Mix 2 μl 模板 DNA/RNA X μl ddH2O up to 20 μl *10x LAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、LoopF/B 分别为 4 μM、F3/B3 分别为 2μM。
2. 反应体系配好后,置于荧光定量 PCR 仪中于 60~68°C(首次实验采用 65°C)进行反应 20~45min。
1min 收集一次荧光信号。读取扩增曲线进行阴性和阳性判读。
使用注意事项:(1)在用于其它恒温扩增反应时(如 CPA、SMAP 等),可参考如上策略进行使用,反应时间可能会需要调整。(2)关于矿物油的使用,在配制完 LAMP 反应体系后,可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部,以减少气溶胶的污染。