Bst DNA Polymerase 2.0
（产品货号：EM113）

描述：

该酶来源于 Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I，通过基因工程手段去除了其5'-3'外切酶活性，而保留了5'-3'聚合酶活性。该酶具有很强的链置换能力，因此是Isothermal amplification (LAMP, RT-LAMP)的绝佳用酶。与野生型Bst DNA聚合酶(大片段)相比，该酶在扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等方面均有大幅提高，同时，该酶可以使用dUTP作为底物进行扩增(Bst大片段无此活性)。

产品组分与规格

货号	组 分	浓度	800U	1,600U
EM113	Bst DNA Polymerase 2.0	8 U/μl	1管×100μl	1管×200μl
	10×Isothermo Buffer	--	1管×1 ml	2管×1 ml
	Mg2+	100 mM	1管×1 ml	2管×1 ml

酶活定义

一个活力单位即在65℃条件下，30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

应用

•适用于要求嗜温链置换的实验和DNA等温扩增实验，如LAMP（Loop-mediated isothermal amplification）；

•富含GC序列的DNA序列测定；

•微量DNA模板的快速测序等。

储存

-20℃，可保存3年。

使用方法

1. 按以下组分配制反应体系：

组分	每管加样量
10×Isothermo Buffer	2.5μl
Mg2+ (100 mM)	1.5 μl
dNTP (10 mM each)	3.5μl
10× Primers	2.5μl
Bst DNA Polymerase 2.0(8 U/μl)	0.25~1μl
DNA模板	10ng~1μg
ddH2O	Up to 25μl
注：Mg2+ 、引物、酶等各组分的最适加入量根据实际优化的最佳量添加。 10× Primers：16μM FIP/BIP、2μM F3/B3、4μM LoopF/B each。

2. 按以下条件在仪器上进行反应条件设置

温度	时间
65℃	30-60min

3. 热失活

温度	时间
85℃	5min

4. 使用注意事项：

4.1 建议使用无模板DNA作为对照检测扩增的特异性。

4.2 如果需要优化，请尝试调整Mg2+（最终为4~10 mM）。

4.3 10×Isothermo Buffer中没有Mg2+，通常6-8mM Mg2+条件下可获得较好的LAMP结果。

4.4 有文献报道加入Tte Uvrd解旋酶可改善LAMP的效果。

详见说明书：Bst DNA酶 2.0使用说明书

本类产品为八联管式检测试剂盒包装形式。
[检验方法]	恒温荧光法