核酸外切酶Ⅲ使用说明书

（产品货号：EM114）

描述：

Exonuclease III的3'→5'脱氧核糖核酸外切酶对双链DNA具有特异性。Exonuclease III从平末端、5'突出端或缺口处降解dsDNA，从DNA链的3'端释放5'-单核苷酸，产生单链DNA片段。由于对单链DNA无活性，因此无法切割3´突出末端。3´→5´外切酶活性对底物切割程度随3´突出末端的长度而变化，4nt或更长的突出末端完全不能被切割。Exonuclease III也有RNaseH、3´磷酸酶和脱嘌呤/嘧啶-核酸内切酶活性。温度、盐浓度、酶和DNA的比例对酶活性有影响，可根据不同反应进行调整。

产品组分与规格

货号	名称	5,000U	25,000U
EM114	Exonuclease III (100 U/μL)	50 μL	250 μL
	10X Exonuclease III Buffer	0.5 mL	1mL×2

储存液及反应液

储存液：50 mM Tris-HCl (pH 7.5 at 25℃)，50mM KCl，1 mM DTT，50% Glycerol。

反应液（1X Exonuclease III Buffer）：10 mM Bis-Tris ( pH 7.0 at 25℃)，10 mM MgCl₂，1 mM DTT。

酶活定义

50μL反应体系中，37℃条件下，30分钟催化产生1 nmol酸溶性总核酸所需要的酶量。

应用

• 生成用于双脱氧测序的单链模板

• 定点突变

• PCR产物克隆

•链特异性探针制备

储存

置于-20°C可保存2年，避免反复冻融。

使用方法

1. 按一下组分配制反应体系

组分	每管加样量
DNA	5 μg
10X Exonuclease III Buffer	5 μL
Exonuclease III	50 U
ddH2O	Up to 50

2. 在37℃条件下，孵育30 min

3. 加入EDTA终止反应

详见说明书：核酸外切酶Ⅲ(Exonuclease III)使用说明书

本类产品为八联管式检测试剂盒包装形式。
[检验方法]	恒温荧光法