【适用范围】
嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)广泛分布于自然界的各种水体,是多种水生动物的原发性致病菌,为条件致病菌,是典型的人-兽-鱼共患病病原菌。 由于嗜水气单胞菌在自然界尤其水中广泛分布,一般为正常共栖菌,因此,长期以来对其致病性并未重视。直到20世纪80年代中后期,由该菌引起的鱼类疾病在中国大面积流行,给渔业生产造成了严重危害才引起重视。1986年,起由嗜水气单胞菌引起的食物中毒、介水传染病、感染性腹泻、 继发感染、败血症等频繁发生。其致病作用已成为公共卫生关注的问题。
本产品为嗜水气单胞菌核酸检测试剂盒,基于先达基因科技有限公司自主开发的体温扩增荧光检测技术,可对待检样品中的嗜水气单胞菌进行定性检测,通过实时扩增曲线,在短时间内判断样品中是否含嗜水气单胞菌,可广泛应用于致病微生物的检测。
【检验原理】
等温核酸体外扩增技术有多种形式,包括链置换扩增(Strand Displacement Amplification,SDA)、转录介导扩增(Transcription-mediated Amplification,TMA)、环介导扩增(Loop-mediated Isothermal Amplification, LAMP)、滚环扩增(Rolling Circles Amplification, RCA)和依赖解旋酶扩增(Helicase-Dependent Amplification, HDA),重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)等。 实时荧光核酸恒温扩增检测技术是将新一代的核酸恒温扩增技术和实时荧光检测技术相结合的一种新型核酸检测技术。该技术具有高灵敏度、高特异性、低污染、反应稳定等优点。
本产品采用恒温扩增技术,通过苏州先达基因科技有限公司自主开发的ERA技术(Enzymatic Recombinase Amplification,酶促恒温扩增技术),根据嗜水气单胞菌ahpA基因序列,设计一套引物,设计引物和荧光探针建立的检测嗜水气单胞菌的核酸荧光定量扩增方法。大量扩增后的产物能够与带有荧光标记的探针相结合,从而产生特定的荧光。该荧光信号可由荧光检测仪器实时捕获,直观反映扩增循环情况。 样品中如果具有微量的嗜水气单胞菌DNA存在时,则能够通过大量扩增后激发荧光信号,样本显示为阳性;如果样本中不含有嗜水气单胞菌,仪器会判读为阴性。
【产品特点】
1. 反应温度更温和
核酸扩增在一个温度下进行(37℃),无需热循环。消耗能量更低,便于现场即时检验。
2. 扩增速度更快,效率更高
先达基因开发的等温扩增技术的扩增效率极高,10~15分钟即可将模板扩增109倍,扩增效率远高于其他核酸检测技术。
3. 检测结果更加准确和灵敏
由先达基因开发的等温扩增体系,为通过基因工程改造的混合酶制剂。相对于其它依赖于温度退火的核酸扩增技术,它充分利用生物酶促反应的高度特异性,反应抑制物更少,有效减少假阴性结果,增加了检测结果的准确性;同时结合荧光检测技术,使得检测更加灵敏。
4. 有效解决了扩增产物的污染问题
扩增产物的污染是核酸检测的控制难点。本公司产品采用实时荧光闭管检测,使污染得到有效控制,减少污染产生,从而大幅度提高检测结果的可靠性。
5. 适配先达基因开发的小型荧光检测仪器。
【适用仪器】
GS8、GT-16、ESE Tube Scanner、Genie II等恒温荧光检测仪, ABI 7500,LightCycler480,CFX 96等荧光定量PCR仪。其它常用荧光定量PCR仪均可使用。
【储存条件及有效期】
本试剂盒保存于-20℃,有效期为12个月。
详见说明书:嗜水气单胞菌核酸检测试剂盒
本类产品为八联管式检测试剂盒包装形式。 [检验方法] 恒温荧光法